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中 文 摘 要

摘要  目的:探讨以CFDA-SE作为示踪剂标记细胞的特性和方法。方法:用不同浓度的羧基荧光素二乙酸盐琥珀酰亚胺酯(CFDA-SE)标记不同肿瘤细胞系,检测0h24h的荧光强度,研究荧光强度变化的时间动力学,选择CFDA-SE标记细胞的最佳浓度;CFDA-SE标记细胞后,孵育时间为1h6h,再用DNA染料碘化丙碇(PI)标记,筛选膜改变即早期凋亡的细胞,流式细胞仪收集1000CFDA-SEPI双标记的细胞并测定调亡细胞的百分率即自然死亡率,研究CFDA-SE对细胞活性的影响。CFDA-SE的标记时间分别为56781015min,测定其荧光强度和细胞的自然死亡率,选择CFDA-SE的最佳标记时间。结果:对于不同肿瘤细胞系,CFDA-SE标记的最佳浓度不同;CFDA-SE对细胞没有毒性,自然死亡率低于5%;最佳标记时间为8min。结论:CFDA-SE具有多个优点:标记细胞稳定,能用于细胞培养时间较长的研究,不影响细胞功能,适用于流式细胞仪的检测,是一种很好的标记细胞的荧光素染料。